ABA激素信号传导通路解析
检测项目
蛋白表达检测:
- PYR/PYL受体丰度:[相对表达量(foldchange),Westernblot灰度分析]
- SnRK2激酶浓度:[μg/mg总蛋白,SDS-PAGE定量]
- ABA响应基因表达:[RD29BmRNA水平(foldinduction),qPCRCt值差异≤0.5]
- 转录因子调控:[ABF2表达量(相对定量值),参照AtGenExpress标准]
- SnRK2磷酸化位点:[Ser/Thr磷酸化率(%),Phos-tag凝胶分析]
- PP2C去磷酸化效率:[底物脱磷酸速率(μmol/min/mg)]
- 受体-配体结合:[Kd值(nM),SPR表面等离子共振]
- 蛋白互作强度:[结合常数(Ka),ITC等温滴定量热]
- SnRK2激酶活性:[Vmax(μmol/min/mg),放射性标记检测]
- PP2C抑制效率:[IC50(μM),荧光底物分析]
- 蛋白亚细胞分布:[核质比(ratio),共聚焦显微镜成像]
- 信号转导动态:[实时荧光追踪(s),FRET技术]
- 干旱诱导效率:[气孔关闭率(%),表皮条分析]
- 盐胁迫耐受性:[存活率(%),幼苗生长试验]
- 受体缺失效应:[表型评分(0-5级),表型筛选]
- 激酶过表达影响:[基因表达变化倍数(fold),转基因分析]
- 化合物库筛选:[抑制率(%),微孔板读板器]
- 基因沉默效率:[敲低率(%),RNAi文库]
- ABA积累量:[ng/g鲜重,HPLC-MS/MS]
- 次级代谢产物:[相对丰度,GC-MS分析]
检测范围
1.拟南芥整株植物:重点检测干旱胁迫下PYR/PYL受体激活及SnRK2磷酸化动态
2.水稻幼苗根系:侧重盐胁迫诱导的ABA积累及PP2C抑制效率评估
3.玉米叶片组织:聚焦气孔导度变化与SnRK2激酶活性相关性
4.烟草细胞悬浮培养:检测ABA信号在细胞分裂中的转录因子调控
5.小麦种子萌发系统:评估ABA介导的萌发抑制及基因表达响应
6.番茄果实发育组织:侧重成熟过程中ABA受体表达与代谢物关联
7.大豆根瘤共生体系:检测ABA信号在固氮效率中的PP2C作用
8.棉花纤维伸长细胞:聚焦ABA对细胞伸长的影响及激酶磷酸化检测
9.杨树木质部组织:评估水分胁迫下ABA信号转导与基因诱导
10.蓝藻模型系统:检测ABA类似物信号通路保守性及互作蛋白验证
检测方法
国际标准:
- ISO20186-1:2020分子生物学定量检测通则
- ISO10993-5:2021生物材料体外检测方法
- GB/T30999-2014植物激素检测技术规范
- GB/T35800-2018蛋白质互作分析标准
检测设备
1.实时荧光定量PCR仪:PCR-8000型(检测范围:10^1-10^9copies/μl,温控精度±0.1°C)
2.蛋白电泳系统:Electrophoresis-200(电压范围:50-300V,凝胶尺寸10x10cm)
3.共聚焦显微镜:Confocal-500(分辨率:0.2μm,激光波长488nm/561nm)
4.表面等离子共振仪:SPR-700(检测限:1nM,流速范围1-100μL/min)
5.高效液相色谱质谱联用仪:HPLC-MS-900(质量精度:±0.01Da,流速0.1-2mL/min)
6.酶标仪:Microplate-600(波长范围:200-900nm,孔板格式96/384)
7.离心机:Centrifuge-3000(转速:100-15000rpm,容量6x50mL)
8.荧光共振能量转移系统:FRET-400(动态范围:1-100ms,灵敏度0.1FRET单元)
9.等温滴定量热仪:ITC-250(温度范围:4-80°C,精度±0.01°C)
10.气相色谱质谱仪:GC-MS-800(检测限:0.1ppb,柱温-50-450°C)
11.细胞培养箱:Incubator-150(温度控制:20-40°C±0.5°C,CO2调节0-20%)
12.超低温冰箱:Freezer-100(温度:-86°C±1°C,容量500L)
13.显微操作平台:Micromanip-350(定位精度:1μm,放大倍数40-1000x)
14.放射性检测仪:Radioassay-450(灵敏度:0.01Bq,能谱范围0-2000keV)
15.高通量筛选系统:HTS-700(通量:10^4样品/天,自动化机械臂)
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。